近日来对于新型冠状病毒检测试剂盒的报道层出不穷,各企业纷纷宣布胜利研制出新型冠状病毒检测试剂盒[1],目前市道上检测试剂盒重要包含分子生物学检测试剂盒跟检测抗原、抗体的免疫学试剂盒[2, 3]。
1 分子生物学检测
分子生物学检测以检测病毒核酸(特异性遗传物质)为主,通过采集患者的鼻、咽拭子,痰液或肺泡灌洗液等样本,提取其中可能存在的新型冠状病毒核酸(RNA)。因为RNA相较DNA不牢固易降解,将其逆转录为DNA,再对DNA进行扩增检测。
目前利用普遍的分子生物学检测方法是RT-PCR——实时荧光定量PCR,采取针对新型冠状病毒的开放浏览框1ab(open reading frame 1ab,ORF1ab)跟核壳蛋白N等守旧基因序列(病毒的特点)设计的引物[4,5],通过荧光标签进行可视化的扩增。
除RT-PCR外,数字PC
R、巢式PC
R、等温扩增技巧跟高通量测序技巧也逐步利用于新型冠状病毒的检测[6-8]。
比较于免疫学检测,分子生物学检测灵敏度跟特异性均明显进步,毛病是耗时较长,对实验设备及检测人员才干请求较高。导管室做心脏造影的地方,一般人是不能进去的。导管室就是介入手术室,主要用途是用于微创检查的。孕妇不宜长期留在导管室或周围,因为里面有辐射,虽然不强,但也要注意。
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1. 国度药品监督治理局新型冠状病毒核酸检测试剂盒
(注册证号:国械注准20203400058)
2 免疫学检测
新型冠状病毒的免疫学检测重要是通过检测患者体内的特异性抗体或病毒抗原来实现。导管室做心脏造影的地方,一般人是不能进去的。导管室就是介入手术室,主要用途是用于微创检查的。孕妇不宜长期留在导管室或周围,因为里面有辐射,虽然不强,但也要注意。
患者在沾染新型冠状病毒后,机领会进行回击抵抗,派遣专业的作战军队——抗体(免疫球蛋白,重要是Ig M跟Ig G),与侵入人体的外敌——抗原(新型冠状病毒)特异性结合并将其毁灭。
常见的特异性抗体检测方法是化学发光免疫剖析法,其中心原理为利用酶标抗体结合磁珠微粒包被的病毒抗原以捕获的血液中特异性抗体,该复合体与底物作用会产生光信号。
艰深来讲就给抗体作战军队配发特别色彩的头盔,通过对这个特别标识的检测即可识别特异性抗体。导管室做心脏造影的地方,一般人是不能进去的。导管室就是介入手术室,主要用途是用于微创检查的。孕妇不宜长期留在导管室或周围,因为里面有辐射,虽然不强,但也要注意。
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2. 化学发光免疫发光法
除了检测抗体外,对外敌病毒抗原的检测也是免疫学检测的重点。
抗原检测重要通过免疫层析法检测标本中新型冠状病毒的核壳蛋白N(nucleocapsid protein,N)[9],其中心原理与上述方法类似,通过胶体金(显色标记物)标记的抗体与病毒抗原及包被抗体结合进行检测。
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3. 胶体金免疫层析法[10]
目前免疫学检测方法重要利用于血液中特异性Ig
M、Ig G抗体跟新型冠状病毒的抗原为主,比较分子生物学检测,其耗时较短,操作简便,疾病不同时代敏感度不同,更适合盛行病学筛查。
近日也有文献报道在沾染患者的粪便中检测出新型新冠病毒[11-12]。听起来像是一个新的检测方法,切实它也是基于粪便样本中检测病毒核酸而实现的。此外,也有研究者通过培养粪便标本中的冠状病毒,而后再基于分子生物学方法进行病毒鉴定。诚然培养法是病原学检测的金标准,但因为培养周期较长,导管室请求高,目前不能全面发展。
新型冠状病毒的不同检测方法原理不尽雷同,无论是免疫学检测还是分子生物学检测,每种考试方法都有其局限性,由此中国疾控中心专家倡导在新型冠状病毒的诊断中结合利用不同类型的试剂盒,做到取长补短。同时也不能忽视CT影像学检测结果,结合患者临床症状进行综合诊疗。
撰文/北京协跟医院 陈新飞 徐英春
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